После событий первого фильма злодейка Стервела де Виль отбыла наказание в тюрьме, где полностью пересмотрела свои взгляды и теперь активно защищает права животных, даже работает в приюте для бездомных псов. Однажды ночью из дома Кевина, владельца собачьего приюта, и его жены Хло, работающей в полиции, таинственно исчезает целая стая далматинских щенков, в том числе только что родившиеся малыши.
